Rotavirusinfektion

Rotavirusinfektion eller intestinal / gastrisk influensa är en infektionssjukdom med symptomatisk behandling. Rotavirusinfektion är vanligast hos barn.

Rotavirusinfektion utgör en särskild fara för barn, eftersom de flesta infektioner uppträder i denna speciella population.

Orsaksmedel av rotavirusinfektion

Infektionen orsakas av rotavirus - virus från Reoviridae-familjen, som liknar varandra i antigenkomposition.

Källa till infektion

Källan till infektion är en sjuk person. Den farligaste med avseende på överföring av infektion är patienten under de första 3 - 5 dagarna av kliniska manifestationer av rotavirusinfektion, eftersom virusinnehållet i utsöndrat avföring är störst under denna period.

Transmissionsmekanism

Huvudmekanismen för överföring av viruset är fekal-oralt, mindre ofta - kontakt-hushållsstigen för propagation genom överföring av rotavirus med infekterade föremål. Speciellt farligt i detta avseende är mejeriprodukter. Låga temperaturer förstör normalt inte viruset, så att lagring av mat i kylskåpet inte hindrar utvecklingen av rotavirusinfektion.

Period av epidemisk rotavirusinfektion

Sjukdomsutbrottet sker under höst-vinterperioden, men under andra årstider kan det också finnas fall av sjukdomsframträdande. Spridningen och förekomsten av karakteristiska symptom på rotavirusinfektion är i regel åtföljd av en influensepidemi, därför är människor smittade med rotavirus, mer allmänt känt som "tarminfluensa".

patogenes

Efter att ha trätt in i människokroppen kommer viruset in i tarmarnas slemhinnor, vilket orsakar förstöring av tarmarnas villi. Syntesen av specifika enzymer, såväl som brott mot sekretorisk funktion av tarmslimhinnan, leder till svår diarré och uttorkning av kroppen på grund av den stora mängden elektrolyter och vatten som kommer in i tarmluften.

Symtom på rotavirusinfektion:

  • nasal congestion;
  • ont i halsen;
  • hosta;
  • buksmärtor;
  • illamående, kräkningar, diarré
  • huvudvärk, feber.

klinik:

De viktigaste perioderna av rotavirusinfektion:

  • inkubationsperioden varar 1-2 dagar;
  • akut period varar 3-7 dagar;
  • återhämtning, varar 4-5 dagar.

Sjukdomen kännetecknas av en akut start, men närvaron av en prodromal period är möjlig (ca 2 dagar). Kan orsaka indisposition, generell svaghet, huvudvärk, ökad trötthet, aptitlöshet, obehagliga känslor och rubbning i magen. Dessutom är utvecklingen av manifestationer av sjukdomen hos den övre andningsvägarna möjlig: nässäppa, ont i halsen, lätt hosta.

Den övergripande kliniska bilden innehåller syndrom av berusning, gastroenterit och lesioner i övre luftvägarna.

Manifestationer av gastroenterit syndrom inkluderar: högt ryck i buken, smärta, mestadels i buken, illamående, kräkningar, diarré. Diarré med rotavirusinfektion har en vattnig skumlikhet och är gul eller grön gul i färg.

Manifestations of intoxication syndrome: trötthet, svaghet, huvudvärk. I allvarliga fall: yrsel, svimning.

Nederst i övre luftvägarna kännetecknas av en rinnande näsa, nästring, ont i halsen, hosta. Zev när den har en ljus röd färg.

Komplikationer och dödlighet

Svåra former av sjukdomen, åtföljd av svår uttorkning, kännetecknas av utveckling av kardiovaskulär insufficiens, jämn död (i 2-3% av fallen). Efter infektionen produceras en instabil immunitet som försvagas över tiden, så återinfektion är möjlig.

Diagnos av rotavirusinfektion

Diagnos av rotavirusinfektion är endast möjlig när rotavirus detekteras hos människor med hjälp av laboratoriediagnostiska metoder, såsom PCR-polymeraskedjereaktion, RPHA-passiv hemagglutinationsreaktion, CSC-komplementbindning, immunofluorescens och många andra.

Fullständigt blodtal kommer att visa leukocytos med neutrofilt vänsterskift, ökad ESR - under akut tid. För återhämtningsperioden karakteriseras av normalisering av blodbilden. Urinalys kommer att visa protein-, leukocyt- och röda blodkroppar, hyalincylindrar i små kvantiteter.

Rotavirusinfektion - behandling av tarminfluensa hos vuxna och barn

Behandlingen är symptomatisk, eftersom det inte finns några specifika antirotavirusmedel för att bekämpa rotavirus.

Principer för behandling av rotavirusinfektion:

  1. Isolering av en patient med rotavirusinfektion
  2. Bekämpa uttorkning. Det är önskvärt att använda speciella saltlösningar för detta, exempelvis rehydron, saltlösning. De används vid behandling av patienten på sjukhuset, men saltlösning för att återställa kroppens normala syrabasstatus kan beredas hemma: 1 tsk till 1 liter vatten. Det rekommenderas att dricka mycket mineralvatten.
  3. Kampen mot temperatur måste börja vid en temperatur av 38, 5 och över. Samtidigt, beroende på typ av feber, är det nödvändigt att använda fysiska metoder för att minska temperaturen, till exempel gnugga kroppen med vatten och kemikalier - ta specifika läkemedel, hos barn är det bättre att använda ljus.
  4. Acceptans av enzympreparat, adsorberande och sammandragande medel (aktivt kol, polysorb), mjölksyrabakterier.
  5. Det är förbjudet att ta smärtstillande medel för smärta i buken.

Indikationer för hänvisning till sjukhus för rotavirusinfektion:

  • progressiv försämring, förlängd diarré;
  • framväxten av nya symptom.

Diet för rotavirusinfektion:

Diet inkluderar att undvika mjölk och mejeriprodukter, inklusive mejeriprodukter. Det är lämpligt att inkludera i kycklingbuljong eller risgröt, kokt i vatten utan tillsats av olja. Det är nödvändigt att äta i små portioner med pauser. Det rekommenderas att begränsa matintaget rik på kolhydrater.

Förebyggande av rotavirusinfektion

Viktiga förebyggande åtgärder för rotavirusinfektion inkluderar:

  • Förhindra att viruset kommer in i kroppen, inklusive att isolera den sjuka, vanliga handtvätten, äta beprövade och högkvalitativa produkter genom att använda destillerat vatten, tvätta grönsaker och frukter;
  • hygienkontroll av cateringfaciliteter och produkter i butiker, marknader.

Innan du använder informationen från webbplatsen medportal.org, läs användaravtalets villkor.

Användaravtal

Webbplatsen medportal.org tillhandahåller tjänster enligt villkoren som beskrivs i detta dokument. Genom att börja använda webbplatsen bekräftar du att du har läst villkoren i detta användaravtal innan du använder webbplatsen och accepterar alla villkor i detta avtal i sin helhet. Vänligen använd inte webbplatsen om du inte godkänner dessa villkor.

Servicebeskrivning

All information som publiceras på webbplatsen är endast som referens, information som tas från offentliga källor är referens och annonseras inte. Webbplatsen medportal.org tillhandahåller tjänster som gör det möjligt för användaren att söka droger i uppgifterna från apotek som en del av ett avtal mellan apotek och medportal.org. För att underlätta användningen av webbplatsens data om droger systematiseras kosttillskott och läggs till en enda stavning.

Webbplatsen medportal.org tillhandahåller tjänster som tillåter användaren att söka kliniker och annan medicinsk information.

begränsning av ansvar

Information som placeras i sökresultaten är inte ett offentligt bud. Administrering av webbplatsen medportal.org garanterar inte exaktheten, fullständigheten och (eller) relevansen av de visade uppgifterna. Administration av webbplatsen medportal.org är inte ansvarig för den skada eller skada som du kan ha lidit av tillgång eller oförmåga att komma åt webbplatsen eller från användningen eller oförmågan att använda den här webbplatsen.

Genom att acceptera villkoren i detta avtal förstår du helt och hållet att:

Informationen på webbplatsen är endast som referens.

Administrering av webbplatsen medportal.org garanterar inte att det finns fel och avvikelser angående deklarerade på webbplatsen och den faktiska tillgången på varor och priser på varor i apoteket.

Användaren förbinder sig att klargöra informationen av intresse genom ett telefonsamtal till apoteket eller använd den information som tillhandahålls efter eget gottfinnande.

Administrering av webbplatsen medportal.org garanterar inte att det finns fel och avvikelser avseende klinikens arbetsschema, deras kontaktuppgifter - telefonnummer och adresser.

Varken administrationen av webbplatsen medportal.org eller någon annan part som deltar i informationsprocessen ska vara ansvarig för eventuella skador eller skador som du kan ha ådragit sig från att ha till fullo åberopat informationen på denna webbplats.

Förvaltningen av webbplatsen medportal.org åtar sig och åtar sig att göra ytterligare ansträngningar för att minimera skillnader och fel i den information som lämnas.

Administration av webbplatsen medportal.org garanterar inte att det saknas tekniska misslyckanden, inklusive med avseende på programmets funktion. Administrationen av webbplatsen medportal.org åtar sig så snart som möjligt att göra sitt yttersta för att eliminera eventuella fel och fel vid händelsen.

Användaren varnar för att administrationen av webbplatsen medportal.org inte är ansvarig för att besöka och använda externa resurser, länkar som kan finnas på webbplatsen, ger inte godkännande för innehållet och ansvarar inte för deras tillgänglighet.

Förvaltningen av webbplatsen medportal.org förbehåller sig rätten att upphäva webbplatsen, för att helt eller delvis ändra innehållet, för att ändra användaravtalet. Sådana ändringar görs endast efter administrativ bedömning utan föregående meddelande till användaren.

Du bekräftar att du har läst villkoren i detta användaravtal och accepterar alla villkor i detta avtal i sin helhet.

Reklaminformation som placeringen på webbplatsen har ett motsvarande avtal med annonsören är märkt "som reklam".

Rotavirusinfektion

Rotavirus (rotavirus gastroenterit) - en akut infektiös sjukdom orsakad av rotavirus, som kännetecknas av symptom på förgiftning och gastrointestinala lesioner med utvecklingen av gastroenterit.

ICD-10-kod
A08.0. Rotavirus enterit.

Etiologi (orsaker) av rotavirusinfektion

Orsaksmedlet är en medlem av familjen Reoviridae, ett släkt av rotavirus (rotavirus). Namnet är baserat på den morfologiska likheten hos rotavirus med ett hjul (från latinska "rota" - "hjulet"). Under ett elektronmikroskop ser virala partiklar ut som hjul med ett brett nav, korta ekrar och en tydligt definierad tunn kant. En rotavirusvirion med en diameter av 65-75 nm består av ett elektrontät centrum (kärna) och två peptidskal: en yttre och en inre kapsid. Kärnan 38-40 nm innehåller interna proteiner och genetiskt material representerat av dubbelsträngad RNA. Genomet av rotavirus hos människor och djur består av 11 fragment, vilket antagligen är orsaken till den antigena mångfalden av rotavirus. Replikation av rotavirus i människokroppen förekommer exklusivt i tarmarnas epitelceller.

Rotavirusinfektion, syn i elektronmikroskop

Fyra huvudantigener hittades i rotavirus; den viktigaste är gruppantigenet, proteinet i den inre kapsidan. gruppspecifika antigener inklusive alla rotavirus är indelade i sju grupper: A, B, C, D, E, F, G. Majoriteten av humana och animala rotavirus hör till grupp A, som är isolerad inom undergrupperna (I och II), och serotyper. Undergrupp II innehåller upp till 70-80% av isolerade stammar från patienter. Det finns tecken på en eventuell korrelation av vissa serotyper med svårighetsgraden av diarré.

Rotavirus är resistenta mot miljöfaktorer: i dricksvatten är öppet vatten och avloppsvatten lagras upp till flera månader, för grönsaker - 25-30 dagar, bomull, ull - upp till 15-45 dagar. Rotavirus förstörs inte genom upprepad frysning, under desinficerande lösningar, eter, kloroform, ultraljud, men dör när de kokas, behandlas med lösningar med pH högre än 10 eller mindre än 2. Optimala förhållanden för virus: temperatur 4 ° С och hög (> 90%) eller lågt (Författare: Infektionssjukdomar: Nationellt ledarskap, redigerad av ND Yuschuk, Yu. Ya. Vengerov. 2009

Diagnosen av rotavirusinfektion

jag hävdar
Biträdande chef
Chief epidemiologiska
Institutionen för hälsovårdsministeriet i Sovjetunionen
G.G.ONISCHENKO

7 mars 1989 N 15-6 / 6

Rotavirusinfektion

(METODISKA REKOMMENDATIONER)

Institutet för poliomyelit och viral encefalit, Akademin för medicinska vetenskaper i Sovjetunionen.

Forskningsinstitutet för epidemiologi i Sovjetunionen Hälsovårdsministeriet;

Forskningsinstitutet för epidemiologi och mikrobiologi. GN Gabrievskogo Hälsodepartementet i RSFSR;

Vetenskaplig produktionsorganisation "Rostepidkompleks";

All-Union Scientific Research Institute för desinfektion och sterilisering av Sovjetunionens hälsovårdsministerium.

Riktlinjerna är avsedda för utövare och forskare inom hälso- och sjukvårdsmyndigheter och institutioner.

Humant rotavirus hör till en grupp av virus som liknar varandra, vilket dessutom innehåller nebraska kalvdiarrévirus (NCDV), epizootisk diarrévirus hos unga möss (EDJM), abenvirus (SA-II), viruset som härrör från tarminnehållet hos får och boskap (0), liksom patogenerna hos diarrégrisar, föl, valpar och andra djur. Alla dessa virus har samma storlek och form och ligger nära varandra i antigena termer.

Rotavirusdjur odlas bra i vävnadsodling, och isolerades därför och studerades före humant rotavirus. Rotavirus kalvar och apor, på grund av deras närhet till de antigena humana rotavirus användes för att fastställa sin etiologisk roll i akut gastroenterit och som hittills använts i deras serologiska diagnos och immunoreagenser.

humant rotavirus detekterades genom elektronmikroskopi i celler duodenal epitel och i extrakt av typiska patienter faeces, där det ofta finns i mycket höga koncentrationer (upp till 10 partiklar i 1,0 gram feces). Rotavirus virion är en tvåkapslad (dvs belagd med en skikt med två skikt), sfärisk partikel med en diameter av 70 - 75 nm, innehåller ribonukleinsyra - RNA (11 dubbelsträngade segment), har en flytande densitet i cesiumklorid på 1,36 g / cu. cm med sedimenteringskoefficient 500-530 S

Enligt de tillgängliga egenskaperna, klassificerades humant rotavirus tillsammans med de ovan angivna djurvirusen som ett genus av Reaviridae i rotavirus. Navnet "rotavirus" härrör från den latinska roten - ett hjul som en partikel av ett virus liknar i elektronmikroskopiska preparat.

Enligt antigenspecificitet, som detekteras av ELISA, är rotavirus indelade i två undergrupper (betecknade med romerska siffror - I och II) och av specificitet som detekterats i neutraliseringsreaktionen, av 4 (och eventuellt mer) serotyper (betecknade med arabiska siffror - 1 2, 3, 4). Undergruppspecifikiteten hos vissa rotavirus bestäms av huvudproteinet hos den inre kapsidan, och deras serotypa specificitet bestäms av glykoproteinet hos den yttre kapsidan. Rotavirus av en ny typ (så kallade pararotavirus) som inte har ett gruppspecifikt antigen har nyligen upptäckts.

Rotavirusinfektion är utbredd. Information om dess identifiering har publicerats i Australien, Storbritannien, GDR, Kanada, Indien, Spanien, USA, Frankrike, Japan och många andra länder. I Sovjetunionen har sjukdomar i rotavirusmagroenterit registrerats bland barn och vuxna i ett antal regioner i RSFSR, Transkaukasien, Ukraina, Baltikum, Centralasien och andra territorier. Bland barn och vuxna kan rotavirusinfektion manifesteras i form av sporadiska fall, lokala gruppsjukdomar och massutbrott med täckning av olika befolkningsgrupper över stora områden. Bland sjukhuspersonal med akuta tarminfektioner är andelen vuxna med rotavirus gastroenterit i genomsnitt 10-15%, barn 15-27% eller mer. Litteraturdata om isolering av rotavirus (antigen) hos friska barn och vuxna är mycket motsägelsefulla: från 0-0,5 till 42% hos barn och från 0% till 7% eller mer hos vuxna. Rotavirusinfektion registreras under hela året. Dock upptäcks över 70% av patienterna under den kalla årstiden. Under vinterns vårår spelas också majoriteten av utbrott av rotavirusinfektion bland befolkningen, liksom gruppsjukdomar bland nyfödda och för tidiga barn, barn till organiserade grupper, äldre. Det fanns inga markanta skillnader i fördelningen av rotavirusinfektioner (både barn och vuxna) efter kön.

Källan för infektion i akuta tarminfektioner av rotavirus etiologi är infekterade vuxna och barn - patienter med en manifest form av infektion eller asymptomatisk utsöndrande rotavirus med avföring. Samtidigt infekteras barn av det första året av livet ofta från mödrar som är infekterade med rotavirus och äldre barn och vuxna från barn till organiserade barngrupper. Infektion av människor från djur är inte bevisat, även om möjligheten till det inte är uteslutet. För närvarande finns rotavirus av olika serotyper i excreta av nästan 50 arter av djur och fåglar med uttalade tecken på diarré och utan dem.

Rotavirus hos patienter och personer utan kliniska manifestationer av sjukdomen finns för närvarande bara i avföring. Patienter utsöndrar rotavirus i miljön, från och med sjukdomsdagen, medan det maximala antalet patogener i avföring (upp till 10 - 10 viruspartiklar per 1 g) påvisades under de första fem dagarna av sjukdomen, vilket bestämmer patientens största epidemiologiska risk för andra denna sjukdomsperiod. Under de närmaste 6 till 10 dagarna faller frisättningen av rotavirus med avföring av patienter kraftigt som avföring normaliserar. Den genomsnittliga varaktigheten av utsöndring av rotavirus hos patienter är 7-8 dagar, men hos vissa patienter kan denna period variera upp till 20-30 dagar. Personer utan kliniska manifestationer av sjukdomen kan långsiktig frisättning av rotavirus med avföring - upp till flera månader eller mer (observationsperiod).

Den huvudsakliga mekanismen för överföring av rotavirus är fecal-oral, vilket uppnås genom vatten, mat och inhemska överföringsvägar. Vid sporadiska och lokala gruppsjukdomar uppträder infektion med rotavirus övervägande av hushållsmedel. Detta bidrar till en mycket lågpatogen dos av rotavirus (inom 10 virala partiklar). Det har fastställts att rotavirus vid olika miljöplatser bibehåller sin livskraft från 10-15 dagar (beroende på temperatur och fuktighet) till en månad. i avföring från flera veckor till sju månader.

För närvarande registreras vatten och matutbrott av rotavirusinfektion i vårt land och utomlands. Rotavirus finns i vattnet i floder, sjöar, hav, grundvatten, kranvatten, vissa livsmedelsprodukter (mjölk, etc.).

Möjligheten att genomföra i vissa fall dropp, damm och andra vägar av rotavirus är förmodlig.

Rotavirus är också känt som ett av de viktigaste etiologiska agenterna vid nosokominala utbrott av akut gastroenterit. På sjukhus med olika profiler kan upp till 50-60% av de sjuka barnen smittas. Det finns fall av utbrott i moderskap. Ofta påverkar barn som är på artificiell utfodring, som lider av akuta och kroniska sjukdomar, med olika typer av immunbrist.

Känslighetsimmunitet. Människor i alla åldersgrupper är mottagliga för rotavirus. Den största mottagligheten observeras hos barn i 6 år. upp till 2 år. Antikroppar mot rotavirus upptäcks hos 50-60% av barnen under det första levnadsåret, över 3 års ålder - mer än i 90% och i nästan alla vuxna. Emellertid, enligt litteraturuppgifter, antyder närvaron av antikroppar i serumet i princip endast mötet av den mänskliga kroppen med rotavirus och inte närvaron av immunitet, eftersom även när en signifikant nivå av humorala antikroppar kan upprepas sjukdom. Immunitet med rotavirusinfektion är inte fullständigt förstådd. Infektionsbeständighet antas huvudsakligen bero på den lokala immuniteten hos tarm-epitelcellerna, som är associerad med närvaron av sekretoriska antikroppar av IgA-klassen. Dessa antikroppar återfinns också i mjölk hos en ammande mamma och verkar som en faktor i den passiva immuniseringen av nyfödda som, i avsaknad av kliniska manifestationer av sjukdomen med avföring, kan frigöra betydande mängder rotavirus i miljön och infektera prematura barn och barn med en ogynnsam premorbid bakgrund. Rotavirus av olika serotyper skapar inte tvärimmunitet, och därför kan samma barn eller vuxen uppleva upprepade sjukdomar på grund av andra serotyper av viruset. Immunitetens instabila natur hos patienter med rotavirus gastroenterit noteras också, upprepade sjukdomar registreras ofta 1-1,5 år efter infektionen.

Funktioner av epidemisk process med rotavirusinfektion:

- Ubiquity av territoriell distribution;

- svår vinter eller vinter vår säsong

- låg infektionsdos av patogenen och högfoci i organiserade grupper;

- skada på personer i alla åldersgrupper

- En hög andel fall bland barn under 2 år med maximal upptäckt av sjukdomar bland barn i andra hälften av livet.

- hög aktivitet av vatten och inhemska överföringsvägar;

- lokalisering av hem foci, mestadels begränsad till familj;

- möjligheten till asymptomatisk isolering av rotavirus bland barn och vuxna;

- möjligheten till nosokomial infektion med deltagande av medicinsk personal och föräldrar till sjuka barn.

Den kliniska bilden av rotavirusinfektion har mycket gemensamt med de kliniska manifestationerna av akuta tarmsjukdomar i en annan etiologi, vilket gör det svårt att diagnostisera denna sjukdom. Det finns emellertid ett antal karakteristiska skillnader som gör det möjligt att tillfälligt misstänka denna sjukdom och genomföra de antidememiska och terapeutiska åtgärderna korrekt.

Inkubationsperioden är kort och varar från 15 timmar till 3 - 5 dagar, men oftast - 1 - 3 dagar.

De flesta patienter har en akut inbrott av sjukdomen, när hela symtomkomplexet utvecklas under sjukdoms första dagar. Hos unga barn är en subakutisk start möjlig, kännetecknad av utseendet i de första dagarna av sjukdomen med 1 eller 2 symtom och tillägget av resten från 2 till 3 dagar av sjukdom. Den mest patognomoniska för rotavirusinfektion är skada på mag-tarmkanalen, vilket hos 60-70% av patienterna kombineras med utvecklingen av symptom på andningsskador. Ibland kan katarralsymptom föregå 3-4 dagar av dysfunktion i tarmarna. Respiratorisk syndrom kännetecknas av måttlig hyperemi och granularitet i struphuvudet, mjuk palats och palatinbågar, nässäppa, hosta, som, till skillnad från ARVI, är mindre uttalad, har ingen tendens att öka och är kortvariga (4-5 dagar). Diarré förekommer hos 95-97% av patienterna. För rotavirusinfektion kännetecknas utvecklingen av gastroenterit, mindre enterit. Stolen är vanligtvis flytande, vattnig, skummig, dåligt färgad, utan föroreningar eller med en liten mängd slem. Hos unga barn råder vattnig diarré, vilket förklarar den frekventare utvecklingen av exsicos i denna åldersgrupp. Frekvensen av avföring i genomsnitt överstiger inte 4 till 5 gånger om dagen, men kan nå 15 till 20 gånger hos yngre barn. Varaktigheten av diarré hos vuxna och äldre barn är 3-7 dagar, hos spädbarn varar ofta upp till 10-14 dagar. Kräkningar är ett kardinalt symptom och noteras hos 80% av patienterna med rotavirusinfektion. Oftast förekommer det samtidigt med diarré eller föregår det. Uppkrävningar upprepas ofta, men på kort sikt (1-2 dagar). Upprepad och okontrollerbar kräkningar för denna infektion är inte typiskt och indikerar ofta en blandad infektion. Temperaturen ligger som regel inte över 38,5 - 39 ° C och normaliseras med 3-4 dagar av sjukdomen. De vanligaste tecknen på allmän förgiftning är svaghet, letargi, svaghet, huvudvärk, yrsel. Svårighetsgraden av sjukdomen bestäms av utvecklingen av isotonisk exsicos, I-II grad, mindre ofta III grad, vilket är vanligare hos spädbarn. Samtidigt är elektrolyttab (Na och K) små, vilket måste beaktas vid rehydreringsbehandling.

4. Diagnos och differentialdiagnos

En objektiv undersökning hos patienter noterade slöhet, konjunktivalhyperemi och vaskulär injektion av sclera. Tungan måttligt belagd, torr. Underlivet är mjukt, måttligt smärtsamt vid palpation i tunntarmen. Lever och mjälte förstoras inte. Blind och sigmoid kolon mjuk, smärtfri. Blodtrycket reduceras. Pulsen är inte överbelastad, men snarare finns det en tendens till relativ bradykardi. Det finns inga meningeal fenomen. I perifert blod i början av sjukdomen kan måttlig leukocytos uppträda, från 2 till 3 dagar av sjukdomen finns en tendens till leukopeni med minskning av antalet leukocytstickor och en ökning av antalet lymfocyter och monocyter, ESR accelereras inte.

I laboratorieanalysen av urin finns en liten albuminuri, en snabbt passande mikrohematuri, en liten ökning av antalet leukocyter, och utseendet av hyalincylindrar är möjligt. Förändringar i urinen är i överensstämmelse med svårighetsgraden av sjukdomen och dehydrering.

Mikroskopisk undersökning av avföringen Antalet leukocyter överskrider inte 10-15 i synfältet, det finns en blandning av slem.

Rektoromanoskopiskt är det möjligt att avslöja måttlig hyperemi hos slimhinnan i rektum och sigmoid-kolon utan fokala förändringar.

Rotavirus gastroenterit divideras med svårighetsgrad, vilket bestäms av intensiteten av diarré och dehydrering som orsakas av den, liksom svårighetsgraden av allmän förgiftning. Det finns tre grader av svårighetsgrad av rotavirus gastroenterit: mild, måttligt tung och mindre ofta svår.

Differentiell diagnos utförs med salmonellos, kolera, dysenteri, matburna toxikinfektioner orsakade av tillståndsbetingade patogena mikroorganismer, persinios och annan viral gastroenterit.

Gastrointestinal form av salmonellos kännetecknas av samtidig sjukdom hos personer som åt produkter av dålig kvalitet. Typiskt akut inbrott: hypertermi, svåra frysningar, kräkningar, kraftig buksmärta, kraftig fetisk avföring som behåller sin fekala karaktär, neutrofila leukocytos med en förändring av leukocytformeln till vänster. När salmonellos, det finns inga förändringar i svalgets slemhinnor, är levern vanligen förstorad. Isolering av patogenen i den bakteriologiska undersökningen av avföring, kräkningar eller magsköljning löser diagnosen.

Enligt många kliniska tecken på mass och sjukdomssituation kan rotavirus gastroenterit likna kolera. Men rotavirusinfektion utmärks av en mildare kurs, och i synnerhet av det faktum att det inte utvecklar tillståndet för algid, såväl som närvaron av typiska förändringar i slemhinnan i orofarynxen.

De viktigaste är resultaten av bakteriologisk forskning vid upptäckt av Vibrio cholerae. En liknande situation uppstår med NAG-infektion.

Bakteriell dysenteri kännetecknas av akut buksmärta, frekvent, ibland falsk, uppmaning, avföring blandad med slem och blod, märkt sigmoidit, konstant feberreaktion, patologiska förändringar i kolonns distala del enligt rektoskopi. Alla dessa tecken, liksom resultaten av bakteriologisk forskning, gör det relativt enkelt att utföra differentialdiagnos för kolitformen av dysenteri. Med gastroenterisk form av dysenteri ökar värdet av bakteriologiska undersökningsresultat dramatiskt.

Differentiell diagnostik av rotavirus gastroenterit och matburna toxicoinfektioner orsakade av opportunistiska patogener är särskilt svåra, med tanke på den otillräckliga kunskapen om den kliniska bilden av dessa sjukdomar. Enligt laboratorieundersöknings diagnostiska betydelse bör preferens ges till positiva resultat av virologiska och immunologiska studier som bekräftar sjukdomen rotavirus, snarare än på detektering av villkorligt patogena bakterier i patientens pall.

För den gastrointestinala formen av perinios är en mer gradvis inledning karakteristisk, närvaron, tillsammans med gastroenterit, av smärtor i muskler och leder. levern är vanligtvis förstorad; avföringen är viskös på grund av en signifikant tillsats av slem och ibland är blod möjligt. Leukocytos noteras i blodet; ESR ökade.

Gastroenterit syndrom kan vara framträdande i vissa virussjukdomar. Dessa innefattar adenoviral infektion, som förutom intestinala lesioner kännetecknas av konjunktivit, rinit, faryngit, tonsillit, bronkit, lunginflammation, en ökning av livmoderhals lymfkörtlar, lever, mjälte, långvarig feber.

Från enterit och gastroenterit, orsakad av enterovirus av Koksaki och ECHO, präglas rotavirus gastroenterit av en monosyndromisk klinisk bild, där tarmskador tar ledande plats. Däremot noteras närvaron av olika kliniska former av sjukdomen under epidemiska utbrott av enterovirus naturen, den "multiformitet" av den kliniska bilden, där symtom på skador på membran i hjärnan, huden och övre luftvägarna kan spela en viktig roll.

Differentiell diagnos av rotavirusinfektion med kolibacillos hos barn är svårast och kan baseras på följande kriterier:

- större akut infektion med rotavirusinfektion jämfört med kolibacillos, särskilt orsakad av enteropatogen kolibacillos;

- snabbare återhämtning från rotavirusinfektion, även hos små barn

- högre frekvens av respiratorisk syndrom vid rotavirusinfektion, men dess mindre svårighetsgrad och varaktighet.

Den största svårigheten är diagnosen blandade rotavirus-bakteriella infektioner, vars andel årets vintersäsonger är ganska stor (7-10% av alla OKI).

Ett kännetecken hos kliniken för blandade infektioner är förekomsten av symtomkomplex som är karakteristiska för båda kombinerade infektionerna: en ökning av symtom på förgiftning, utseendet på tecken på inflammatoriska förändringar i slemhinnan i lymfkörteln och tunntarmen och en långsammare återhämtning.

Sjukhusisering av barn och vuxna med misstänkt OCI orsakad av rotavirus utförs enligt klinisk (sjukdomssvårighetsgrad) och epidemiologiska indikationer (närvaro av svaga barn i patientens miljö, barn i det första året av livet, närvaro på förskolebarns institutioner, livsmedelsarbetare oförmågan att följa anti-epidemic regimen hemma etc.). Barn under ett år med svåra OCI-symtom är på sjukhus först. Separat sjukhusvistelse av patienter med misstänkt rotavirus gastroenterit och akuta tarminfektioner med olika etiologi (separata avdelningar, lådor) är obligatorisk. Principen om "en gångs fyllning" av kamrar (lådor) måste följas.

Behandling av patienter med rotavirus gastroenterit, med beaktande av de befintliga idéerna om patogenesen av denna sjukdom, innefattar en sparsam behandling och kompensation för brott mot funktionens tillstånd i tarmen, återställande av hydroelektrolytbalansen och avgiftning av kroppen.

Vid tidpunkten för sjukdomen är en 4-B-diet ordinerad, där det finns en kraftig begränsning av kolhydrater (upp till 200 g) och en ökning av mängden protein (upp till 150 g) med en liten minskning av kaloriinnehållet (2400 cal). Mängden socker är begränsat till 40 g per dag, grönsaker och frukter. Mjölk är utesluten. Salt är inte begränsat.

Syftet med sådana inhemska matsmältnings-multienzympreparat som oraz, solizim, somilas, som vid behandling av patienter med rotavirusmagroenterit inte är sämre än import (panzinorm, digestal, festal, trienzym etc.) visas.

Graden av uttorkning av organismen utvärderas nödvändigtvis och terapi utförs för att fylla på överskottsförlusterna av vatten och salter. När dehydrering är I-II grad enligt V.I. Glukoselektrolytlösningar administreras oralt till Pokrovsky (rehydronglukosolan), med hänsyn tagen till förlusten av fluider och elektrolyter, och vid uttorkning av III-graden är det nödvändigt att börja behandling med intravenös administrering av vattenlösningar (trisol, kvartsol, chlosol, acesol) etc.

Taktiken för införandet av lösningar utförs i enlighet med principerna för rehydreringsterapi.

För att stabilisera normal blodcirkulation och avgiftning kan du komma in i kolloidala lösningar (gemodez, polyglukin, reopolyglukin).

Det måste understrykas att receptbelagda antibakteriella läkemedel, om det inte finns någon samtidig bakteriell infektion, inte är motiverad.

Det är lämpligt att använda adsorbent och astringentiska läkemedel.

Behandling av virusinfektion utvecklas inte för närvarande.

Extraktet av konvalescenter utförs efter en stabil (inom 2-3 dagar) normalisering av avföringen och försvinnandet av alla andra kliniska symptom på den underliggande sjukdomen i frånvaro av komplikationer.

Barn som går i förskolan, livsmedelsarbetare och personer som likställs med dem ges en engångs virologisk undersökning efter försvinnandet av kliniska symptom.

De återstående kontingenterna hos patienter är inte föremål för obligatorisk laboratorieundersökning.

6. Laboratoriediagnos

Laboratoriediagnos av rotavirus gastroenterit är för närvarande inte svår. Den snabba utvecklingen av kliniskt syndrom och kortvarig sjukhusvistelse dikterar behovet av att använda snabba metoder för att bestämma sjukdomsets etiologi. De flesta av de laboratoriediagnostiska metoder som rekommenderas i den här handboken låter dig upptäcka rotavirus under den första dagen. Valet av metod i varje fall bestäms av laboratorieens tekniska utrustning samt tillgången på lämpliga reagens.

Traditionella metoder för att detektera serologiska förändringar i sera av patienter (neutraliseringsreaktion, hemagglutinationsinhibering och komplementbindning) är viktiga vid den retrospektiva analysen av sjukdomen. Därför rekommenderas bestämning av IgM-klass antikroppar för den tidiga serologiska diagnosen av rotavirusinfektion.

Syftet med den virologiska studien av en sjuk person är vanligen avföring. Närvaron och fördelningen av rotavirus i miljön upptäcks genom att undersöka prover av jord, mat och vatten (avloppsvatten, vatten från naturliga och artificiella reservoarer, dricksvatten).

6,1. Detektion av rotavirus i kliniskt material

och i miljöprover

6.1.1. Provberedning för testning; provtagning

Vid provtagning för virologisk forskning är vissa allmänna krav uppfyllda och åtgärder vidtas för att skydda materialet mot förorening. Prover tas endast i sterila rätter med en tät gummipropp, förstärkt limpasta. Transportprover i behållare med is eller kylmedel.

6.1.2. Suspenderingsberedning, förtydligande,

provrengöring, avlägsnande av bakteriell flora

Framställning av prover av avföring för en studie på rotavirus innefattar framställning av en 10% suspension, homogenisering, centrifugering vid 3000 rpm. inom 30 minuter för att ta bort bakteriefloran. Vid granskning av miljö- och livsmedelsföremål utförs förkoncentration av det studerade materialet.

6.1.3. Koncentration av viruspartiklar i vattenprover

Koncentrationen av rotavirus är ett viktigt villkor för att öka effektiviteten av deras detektion i vattenkroppar i miljön.

Metoden att koncentrera rotavirus med adsorptionskromatografi på poröst kisel-makroporöst glas (MPS) - är enkelt och bekvämt med användning av vattenvolymer från 0,1 till 10 liter. När ett prov passerar genom ett lager av MPS, sorberas viruset på ytan av glaset. För eluering av viruset med användning av lösningar som har förmågan att orsaka desorption av viruset. Viruset avlägsnas från glaset med en liten volym lösning, vilket leder till en koncentration av tiotals hundratals gånger jämfört med det ursprungliga provet.

För att förbättra adsorptionsegenskaperna behandlas hushållsberedningar av glas i MPS-1000 VGH-märket enligt följande: En blandning (1: 1) av 3% HO och 6 M HCl framställs. Glaset fylls med den framställda blandningen med en hastighet av 1 volym glas för 2 volymer av blandningen. Koka i en avloppsugn (utan stopp) i 1 timme, följ säkerhetsföreskrifterna. Tvätta till neutralt pH med destillerat vatten. Torka vid 100 ° C.

Glaskolonn, förbehandlad med silikonvätska, fylld med glas (2 - 3 cc), Blöt i destillerat vatten. Till provet (3 liter) tillsätt 1 M lösning av MgCl till en slutlig koncentration på 0,05 M. Vatten passerar genom kolonnen med en hastighet av 150-500 ml / timme och justerar flödeshastigheten med hjälp av klipp. Passera genom kolonnen 10 ml av en elueringslösning: kött-extrakt 3%, pH 9,0; eller tryptosfosfatbuljong 1%, pH 9,0; eller Tris HCl 0,1 M, innehållande 2 M NaCl, pH 11,0 (lösningar listas för att minska deras elueringsegenskaper). Sorbat fraktionerna med en volym av 1 ml, pH-värdet i fraktionerna bringas till ett neutralt värde.

6,2. Detektion av virala partiklar med hjälp av elektronmikroskopi (EM) och immunoelektronmikroskopi (IEM)

Eftersom innehållet av rotaviruspartiklar i avföring hos typiska patienter vanligtvis är högt under de första 2-3 dagarna av sjukdom, används EM-metoden i stor utsträckning för att detektera rotavirus, vilket kan användas för att detektera rotaviruspartiklar utan ytterligare koncentration av fecalsuspensionen.

För beredning av droger appliceras en droppe av den undersökta 10% suspensionen på en platta av tandvax eller vaxat papper. På en droppe av film-substratet sätta på ett ämne elektronmikroskopiskt rutnät. Efter 1 - 3 minuter gallret tvättas på en droppe destillerat vatten och en kontrastlösning (2% lösning av fosforotungsyra, justerad till pH 6,5 - 6,6 med 1 NKOH), vars överskott efter 30-40 sekunder. ta bort filterpapperet och nätet torkas. Visning av förberedelserna utförs i ett elektronmikroskop med en instrumental förstoring av 30 - 50000x.

Rotavirus upptäcks ganska lätt genom EM-undersökning av fekala suspensioner i karakteristiska storlekar och morfologi av viruspartiklar. Rotavirus ska differentieras från olika viruspartiklar och virusliknande formationer, bakteriofagpartiklar och bakteriell flagella som finns i fekalt material.

Användningen av IEM-tekniken gör det möjligt att i vissa fall inte bara öka andelen av detektion av rotavirus men också att bevisa deras etiologiska roll. För IEM-studien blandas 0,1 ml 1: 5 utspätt immunserum av djur med 0,4 ml 10% fekal extrakt. Blandningen inkuberas i 1 timme vid rumstemperatur och därefter i 12 timmar vid 4 ° C, varefter den centrifugeras i 90 minuter. vid 15 000 rpm Supernatanten dräneras och den resulterande fällningen resuspenderas i några droppar destillerat vatten, kontrasterad med en 2% lösning av fosforotungstursyra (pH 6,5) och placeras på objektgaller; överskott av fukt tas bort med filterpapper. Studien av läkemedel utförs i ett elektronmikroskop med en instrumental förstoring av 50000x, tittar på minst fem celler i ämnesnätet. Vid ett positivt resultat detekteras rotaviruspartiklar i preparat i form av specifika kluster (immunkomplex).

6,3. Detektion av rotavirusantigen i testmaterialet

6.3.1. Få immunoreagenser

Hyperimmuna sera och specifika rotavirusimmunoglobuliner erhålles genom immunisering av kaniner, marsvin, kycklingar.

Antigen för immunisering framställdes enligt följande: 5 ml odlingssuspension av rotavirus SA-II behandlades med trypsin, sattes till 1,5 liter madrassflaskor med ett monoskikt av heteroploida celler av den gröna apa-njuren 4647, inkuberades under 60 minuter vid 37 ° C; tillsätt serumfritt underhållsmedel och inkubera i 24 till 48 timmar vid 37 ° C. All biomassa utsätts för 3-faldig frysning eller sonikering, tillsätt PEG M 6000 till 8-10% koncentration, lämna i 20 timmar vid 4 ° C och centrifugeras därefter vid 10 000 rpm. 2 timmar Pelleten resuspenderas i PBS (1/30-1/50 av biomassvolymen). Efter rengöring med freon 113 används vattenfasen för att immunisera djur och som ett antigen i immunologiska studier. Koncentrat i en volym av 1 ml innehåller minst 10 viruspartiklar.

Immunisering av kaniner: kaniner injiceras intravenöst med 2 ml rotaviruspreparat på dagarna 1, 7, 35, 42 och blod tas på dag 49 efter starten av immuniseringen. På dagarna 1 och 35 injiceras antigenet med ytterligare Freunds kompletta adjuvans vid flera punkter i ryggen.

Immunoglobulinfraktionen utfälls från hyperimmun kaninserum med 10% vattenhaltig lösning av polyetylenglykol (PEG) med en molekylvikt av 6000. Fällningen uppsamlas genom centrifugering, löses och dialyseras mot 0,01 M K-fosfatbuffert (pH-7,4) med 0: 1 M Nace ( FSB). Koncentrationen av immunglobuliner bestämdes spektrofotometriskt.

Immunisering av marsvin: djur injiceras intramuskulärt med 0,5 ml av en koncentrerad rotaviruspreparat med en lika stor volym Freunds kompletta adjuvans vid 1,14 och 28 dag, blodprovtagning två veckor efter den senaste immuniseringen.

Immunisering av kycklingar: 20 veckor gamla höns av höns av hybrider av rasen vit Leggorn "Zarya-17" immuniseras intravenöst vid 1, 14, 28 dagar. Under den första immuniseringen administreras antigenet ytterligare intramuskulärt i en blandning med en lika stor volym Freunds fullständiga adjuvans. Den maximala mängden antikropp i äggula observeras efter den tredje immuniseringen. Kycklingar kan användas permanent efter reimmunisering.

Isolering av kycklingar immunoglobuliner: äggulan separeras från proteinet i skalet eller Büchner-tratten och tvättas med kranvatten. Gommen (10 ml) överförs till ett centrifugrör, tillsätt dubbel volym (20 ml) av FSB och blanda noggrant. PEG 6000 appliceras till en koncentration av 3,5% (vikt / volym) och blandas i 10 minuter. vid 14000 g. Supernatanten filtreras genom ett filterpapper i en graderad cylinder. Tillsätt ytterligare PEG 6000 till en slutlig koncentration av 12% och blanda. De utfällda immunoglobulinerna uppsamlas genom centrifugering (10 min 14 000). Fällningen löses i 5 ml FSB (1/2 volym äggula). Koncentrationen av protein i beredningen är vanligen 6-12 mg / ml.

6.3.2. Metod för enzymimmunanalys (ELISA)

Metoden för enzymimmunanalys (ELISA), baserat på användningen av antikroppar märkta med en enzymmolekyl (peroxidas), är en av de vanligaste och mest effektiva och specifika metoderna för detektering av viralt antigen. Använd vanligtvis de direkta och indirekta "sandwich" -alternativen. Enzymmarkör detekterad i färgreaktion med substratet. Den direkta ELISA-varianten är snabbare än den indirekta, men den är mindre känslig och specifik. I formuleringen av en indirekt variant används ett anti-specifikt kommersiellt konjugat av immunglobuliner med ett enzym; För att förhindra icke-specifika interaktioner mellan konjugatet och antikropparna sorberade på panelen är det nödvändigt att ha antivirala sera av två olika djurarter.

Indirekt ELISA-variant: 0,1 ml anti-tromtaunimmunglobuliner från äggulan av immuniserade kycklingar i hälften (48) av brunnarna införes i brunnarna. I den andra halvan introduceras immunoglobuliner från ägg som läggs före immunisering som negativ kontroll. Sorptionen av immunglobuliner utförs från en lösning med en koncentration av 5 | ig / ml i PBS över natten vid 4 ° C. Innehållet i brunnarna dräneras, brunnarna tvättas med PBS-T och 0,1 ml av provet appliceras i PBS-T med 1% BSA och 0,01 M EDTA till brunnarna med antirotavirus och normala immunglobuliner och inkuberas under 1 timme vid 37 ° C.

Efter tvättning tillsätts 0,1 ml kanin anti-rotavirus serum utspätt till 1: 1000-1: 25000 till brunnarna i PBS-T-buffert. Den optimala utspädningen av serum bestäms i förinställda experiment. Panelerna är stängda och inkuberade i 2 timmar vid 37 ° C. Brunnarna tvättas och 0,1 ml av en kommersiell beredning av peroxidas-märkta antikroppar mot kanin-IgG i en koncentration av 1 till 2,5 | ig / ml i peroxidasinnehållet i PBSB-T-BSA tillsättes och inkuberas i 1 timme vid 37 ° C. Brunnarna tvättas, tillsätt 0,1 ml nyberedd substratblandning (O-fenylendiamin 0,5 mg / ml i 0,05 M Na-citratbuffert pH 5,0; HO - 0,03%. var försiktig!)) och inkubera vid rumstemperatur i mörkret i 30-40 minuter. Den enzymatiska reaktionen stoppas genom tillsats av 0,05 ml 3 M H SO. Resultaten av reaktionen tar hänsyn till visuellt eller spektrofotometriskt. Prover anses vara positiva, vars optiska densitet är inte mindre än 2 gånger den optiska densiteten hos den negativa kontrollen.

6.3.3. Coagglutinationsmetod

Denna metod är baserad på förmågan hos protein A Staphylococcus aureus av Cowan-stammen att ansluta till Fc-fragmentet av IgG och, under bildandet av ett specifikt antigen-antikroppskomplex, orsakar agglutinationsfenomenet.

För formuleringen av koagglutineringsreaktionen användes ett kommersiellt torrt stafylokockreagens innehållande protein A (Pasteur Research Institute of Electrochemical Medicine, Leningrad), som rehydreras före användning i en 0,1% lösning av metylenblå.

Tidigare testades varje serie av hyperimmun serum för närvaron av antistapylokockantikroppar. För att göra detta, blanda på en glasskiva lika volymer serum med en utspädning av 1: 500 och 10% suspension av stafylokocker. Ta hänsyn till resultaten inom 5 minuter efter utbildning agglutinat. För arbetet med utvalt serum, som inte innehåller antistapylokockantikroppar vid en spädning av 1: 500. För beredning av diagnostik blandas 0,01 ml serum anti-ratavirus utspätt 1:10 med FSB med 0,5 ml 10% suspension av stafylokocker, hålls vid rumstemperatur i 1 timme och därefter tillsätts 9,5 ml FSB (diagnostik). På samma sätt sensibiliseras stafylokocker med preimmunserum (kontrollreagens). Diagnostik- och kontrollreagens används vid reaktionen av PKA och TRKA.

För att placera RCA i panelens uformade brunnar, gör 0,05 ml PBS pH-7,4; i två brunnar gör Takacchi mikrotiter eller dispenser 0,05 ml 10% suspension av avföring och förbereder seriella tvåsidiga utspädningar av 1: 2-1: 256. Till brunnarna i den första raden tillsättes 0,05 ml diagnostik och till brunnarna i andra raden 0,05 ml kontrollreagens. Panelerna är täckta med lock och inkuberas i en termostat vid 37 ° C - 3 timmar. I varje försök gjordes ett prov av en suspension av feces positiva och negativa för rotavirus, såväl som lysat av celler infekterade med rotavirus SA-II, som tidigare testades med elektronmikroskopi.

Behandling av reaktionen: Resultaten anses vara positiva när ett agglutinerings "paraply" detekteras tillsammans med diagnosen, med ett negativt resultat eller en 4-faldig minskning av titer parallellt med kontrollreagenset. Resultaten anses negativa när skivor bildas i båda parallella raderna. För att eliminera icke-specifik koagglutination i de parade raderna adsorberas avföringens suspension med en lika stor volym normalt kaninserum vid 37 ° C under 2 timmar följt av upphettning vid 80 ° C i 45 minuter. Upprepa sedan i reaktionen av koagglutination.

6.3.4. Metod för fastfasreaktion av koagglutination (TRKA)

Denna metod för detektering av rotavirusantigener är baserad på principerna för immunfelmetoden för fast fas (se 4.3.2). I motsats till det andra använder TRCA emellertid inte enzymet som en etikett, men diagnostik- och kontrollreagenset (se 4.3.3).

För staging använder TRKA immunologiska paneler med uformade brunnar. För sensibilisering sätts 0,1 ml hyperimmun serum utspätt med 0,01 M karbonat-bikarbonatbuffert (pH 9,6) 1: 1000 till brunnarna. Serumpaneler lämnas i 2 till 3 timmar vid 37 ° C. Ej bundna till fastfasantikropparna avlägsnas genom tvättning tre gånger i 3 minuter. FSBT. Därefter gör 0,05 ml av de studerade, såväl som uppenbarligen positiva och negativa prover (2 brunnar för varje prov) i brunnarna och lämnar i 2 timmar vid 37 ° C för att bilda antigen-antikroppskomplex. Obundet antigen och besläktade föroreningar avlägsnas genom triple tvätt av PBS. Därefter tillsättes i en brunn 0,05 ml 0,5% stafylokockdiagnostik i den andra (kontrollen) 0,05 ml 0,5% suspension av stafylokocker sensibiliserad med preimmunserum (se 4.4.3). Inkubation utförs antingen i 1 till 2 timmar vid 37 ° C, följt av placering under 1 till 3 timmar vid 4 ° C eller i 18-24 timmar vid 4 ° C. Resultatet av agglutineringsreaktionen beaktas visuellt: med en positiv reaktion bildar de agglutinerade bakterierna ett paraply; med en negativ reaktion - bakterierna löser sig helt i form av en skiva.

6.3.5. Metod för indirekt hemagglutination

Vid denna metod är detektion av rotavirusantigen baserat på användningen av ett erytrocytantikroppdiagnostik, vilket är en får-erytrocyter sensibiliserad av immunoglobulin-ascitesvätskan av vita råttor immuniserade med rotavirus SA-II.

Tvåfaldiga utspädningar av 10% fekal suspension i panelbrunnarna testas med ett erytrocytdiagnostik. Agglutinering av erytrocytdiagnostik indikerar närvaron av rotavirusantigen i provet. En detaljerad beskrivning av förfarandet för formulering av PHA finns i instruktionerna som bifogas preparatpaketet (Scientific-Production Association "Rostepidkompleks", Rostov-Don).

Rotatest-kit bygger på omvänd passiv hemagglutination och är konstruerad för att detektera rotavirus i avföring och att detektera antikroppar mot rotavirus i blodsera.

6.3.6. Metod för immuncytokemisk detektion av rotavirus

Metoden är baserad på immunokemisk bestämning av viralt antigen syntetiserat i celler som ett resultat av deras infektion med ett virusinnehållande material.

Fördelen med metoden jämfört med ELISA är i högre känslighet, liksom förmågan att bestämma och kvantifiera provprovets smittsamhet.

Staging av experimentet: Transplanterade celler i njuren av en grön apa vid en koncentration av 3 till 10 celler / ml gör 0,2 ml i brunnarna i plana bottenplattor och inkuberas vid 37 ° C (24 till 48 timmar). Cellerna tvättas sedan med Eagle-MEM-medium. Testmaterialet utspädes i Eagle-MEM-medium, aktiverat under 1 timme vid 37 ° C i närvaro av 10 | ig / ml trypsin och tillsattes i 0,1 ml i minst 4 brunnar. Positiva kontroller är brunnarna i vilka materialet som är känt att innehålla rotavirus har införts. Negativa kontroller: brunnar med oinfekterade celler och brunnar, i vilket material införs som testet, men inte innehåller rotavirus. Adsorption utförs i 1 timme vid 37 ° C, sedan avlägsnas mediet, cellerna tvättas med Eagle-MEM-medium. Tillsätt 0,2 ml Eagle-MEM-medium med 1 μg / ml trypsin i brunnarna och inkubera i 48 timmar vid 37 ° C.

Celler tvättas två gånger med saltlösning och fixeras med kallt (-20 °) 85% aceton, inkuberas i 2 timmar vid -20 ° C, varefter aceton avlägsnas. Panelen tvättas 3 gånger med PBS innehållande 0,05% Tween 20 (PBS-T). 0,1 ml utspädd 1: 1000 i PBS-T immun rabies anti-rotavirus serum sättes till brunnarna. Inkubera i 2 timmar vid 37 ° C. Efter tvätt av panelen tillsätts 0,1 ml av en peroxidasmärkt anti-IgG-kaninantikropp (kommersiell beredning) till brunnarna i en brunn i en koncentration av 2 | ig / ml av peroxidasinnehållet i PBS med 1% BSA och inkuberas i 1,5 timmar vid 37 ° C C.

Panelen tvättas 2 gånger med PBS-T och 1 gång med 0,05 M acetatbuffert, pH 5,0. 0,1 ml av en nyberedd lösning av peroxidas-substrat innehållande 10 ml acetatbuffert / 4 mg 3-amino-9-etylkarbazol (AEC) upplöst i 0,5 ml aceton och 0,01 ml 33% väteperoxid sättes till brunnarna. (OBS! Att arbeta med AEC kräver försiktighet). Inkubera i 30-40 minuter. i mörkret vid rumstemperatur. Reaktionen stoppas genom att tvätta panelen med destillerat vatten.

Redovisning för reaktionen utförs under ett ljustmikroskop med en liten förstoring. Negativa kontrollbrunnar får inte innehålla färgade celler. Lokala kluster av färgade celler är foci av virusinfektion.

6.3.7. Immunofluorescensmetod

För att identifiera rotavirusantigenet med användning av immunofluorescens används en cellinje 4647. Celler odlas på täckglas eller glidor inneslutna i penicillinflaskor eller -rör. Den infekterade kulturen inkuberas vid 37 ° C i 24 till 48 timmar, varefter glasögonen avlägsnas från flaskorna, tvättas i 0,15 M saltlösning med tillsats av fosfatbuffert vid pH 7,2, sköljs med destillerat vatten och torkas i luft. Sedan fixeras beredningarna i två skift (10 minuter vardera) kemiskt ren aceton kyld till 4 ° C.

Preparaten behandlas med en indirekt metod i en fuktig kammare. En droppe immun-rotavirus kaninserum appliceras på odlingscellerna och inkuberas i 30 minuter. vid 37 ° C tvättas läkemedlen tre gånger i FSB och avlägsnar överskott av fukt. Våt preparat färgas med en blandning av lika stora volymer anti-FITC-konjugat och bovint albumin, märkt med rhodamin och inkuberas i 30 minuter. vid 37 ° C Efter 3 gånger tvättning i FSB torkas preparaten i luft. För att eliminera icke-specifik fluorescens adsorberas antiviralt serum före användning med ett homogenat av normal cellodling och FITC-konjugatet behandlas med aktivt kol enligt standardmetoder.

Följande kontroller används som obligatoriska kontroller: Preparat av oinfekterade kulturer behandlade på liknande sätt och preparat av infekterade kulturer behandlade i första steget av normalt och heterologt antiviralt serum av samma art som immunserum till rotavirus.

I fallet med positiva resultat observeras en distinkt ljusgrön fluorescens i cytoplasman hos cellerna.

6,4. Elektroforer-metoden för rotavirus

Metoden är baserad på identifieringen av rotavirus med användning av polyakrylamidgelelektrofores av virala genomiska RNA-segment. Metoden möjliggör differentiering av rotavirusstammar på basis av skillnader i elektroforetisk rörlighet hos individuella RNA-segment av olika isolat, och används därför allmänt i epidemiologiska studier. Metoden kräver inte förkultivering av isolat, har hög känslighet och absolut specificitet.

Metoden är av särskilt intresse för epidemiologer vid utredningen av gruppsjukdomar vid utbrott av rotavirusinfektion.

Det kan utföras på grundval av laboratorier utrustade med elektroforesapparat.

För analysen är 0,2-0,5 ml 10-20% fekal suspension tillräcklig. Suspensionerna behandlas med freon 113 och inkuberas med pronas (0,2 mg / ml, 15 minuter) i närvaro av natriumdodecylsulfat (1%) och natriumetylendiamintetraacetat (0,001 M). Efter tillsats av natriumacetat (0,3 M) deproteiniseras RNA med en blandning av fenol: kloroform-isoamylalkohol och utfälles med 2,5 volymer etanol (18 timmar vid -20 ° C eller 2 timmar vid -70 ° C). Fällningen uppsamlas genom centrifugering, löses i vatten och dissociationsbuffert tillsätts. Elektrofores utförs enligt metoden för Laemmli i plattor med 10% gel. Silvernitrat (0,011 M) brukar användas för att få RNA i en gel. Efter förfarandet för manifestation i gelén är 11 band av RNA synliga, motsvarande det rotavirus genomiska segmentet.

6,5. Bestämning av klass M immunoglobulin i serum

en patient med rotavirusinfektion med fastfasmetoden

koagglutineringsreaktioner (TRCA)

I detta fall används principen för solidfas-koagglutineringsreaktion (se 4.3.4) vid modifieringen: för sensibilisering av panelbrunnarna använd 0,1 ml kommersiellt lammmonospecifikt serum mot humant IgM vid en spädning av 1: 1000. Panelerna inkuberas i 2-4 timmar vid 37 ° C. Därefter tvättas brunnarna med FSBT, fylles med 3% gelatinlösning och lämnar i 30 minuter vid 37 ° C. Brunnarna tvättades FSBT och gjorde 0,05 ml av de studerade såväl som avsiktligt positiva och negativa sera, utspädd 1: 100 FSBT (2 hål för varje serum). Vid bestämning av antikroppstiter undersöks dubbla utspädningar av de testade proverna (1:10 - 1: 1280). Panelerna inkuberas i 2 timmar vid 37 ° C och efter tvätt införs 0,05 ml diagnostiskt och kontrollreagens i de parade brunnarna. Reaktionen beaktas efter 1 - 2 timmar (se ovan 4.3.4).

Samma princip, modifierad av TRCA, används för att testa IgA- och IgG-antikroppar för rotavirusinfektion, liksom vid analys av kolostrum och mjölk för laktoglobuliner.

Metoden för bestämning av klass M immunoglobulin i patientens serum används för både tidig diagnos av manifesta former och deras differentialdiagnos med asymptomatiska former av rotavirusinfektion.

7. Anti-epidemiska åtgärder

Varje fall av akut tarminfektion orsakad av rotavirus, särskilt barn i det första levnadsåret, liksom barn som går i förskolans institutioner, behöver noggrann epidemiologisk analys för att identifiera källan, huvudvägarna och överföringsfaktorerna för att i tid kunna genomföra anti-epidemiska åtgärder i utbrottet.

Åtgärder som syftar till att identifiera och neutralisera smittkällan. Detektion av patienter som misstänker sjukdomen utförs av läkare från alla hälsovårdsinstitutioner: vid polikliniska besök, hembesök, medicinska undersökningar av barn i institutioner, sjukhus etc. De identifierade patienterna är isolerade från barngrupper. Medicinsk observation och behandling av patienter kan utföras hemma eller på sjukhus. Barn som närmar sig barns institutioner som släpps ut från sjukhuset eller som har slutfört hembaserad behandling med negativa laboratorietester, får tillträde till barngrupper på grundval av barnläkars intyg. Barn som har haft WG och fortsätter att utsöndra rotavirus (eller rotavirusantigen) med avföring utan kliniska manifestationer av infektion kan införas till daghem och dagisgrupper i dagis och förskolor som är föremål för organisation av kontinuerlig medicinsk observation och upprepad laboratorieundersökning om 2-3 veckor från början av sjukdomen eller virusisolering.

Epidemiologisk undersökning av familjefoci hos patienter med FG utförs med sjukdom hos barn under 2 år och vuxna från antalet förordnade kontingenter. Epidemiologen går till barnens institution med en undersökning om det upprepas fall av icke-bakteriell gastroenterit.

Medicinsk observation av barn som kommunicerar med patienter utförs inom fem dagar efter det att den sista sjuk personen isolerades.

Laboratorieundersökningar för rotavirus (antigen) hos barn och vuxna som har kommunicerat med patienter, både i familjen och i organiserade grupper, utförs enligt infektiologens och epidemiologens instruktioner om det finns indikationer (förekomst i familjen eller i barns team med upprepade sjukdomar OKI med liknande klinik) grov kränkning av hygien- och hygienregimen, närvaro vid utbrott av arbetstagare i livsmedelsföretag och personer som likställs med dem etc.). Obligatorisk laboratorieundersökning är föremål för mor till ett sjukt barn under det första levnadsåret. Personer i vilka rotavirus (antigen) finns i fecesen är föremål för grundlig klinisk undersökning av en smittsam specialist. I avsaknad av kliniska manifestationer av sjukdomen är inte barn och anställda från laget isolerade.

Anställda av livsmedelsföretag, vattentjänster mm vid tidpunkt för laboratorieundersökning och medicinsk övervakning är anställd inom anläggningen. Upprepad laboratorieundersökning av personer som utsöndrar rotavirus (antigen) med avföring, utförs enligt receptet hos infektiologen och epidemiologen med ett intervall om 5-7 dagar med hjälp av en omfattande laboratorieundersökning.

Om gruppsjukdomar uppträder hos barns institutioner, genomförs karantänåtgärder inom 5 dagar från det att den sista patienten isolerats.

Institutionerna genomför regelbundet sanitära och pedagogiska arbeten för att förebygga rotavirusinfektion.

Åtgärder som syftar till att bryta mekanismen för överföring av infektion.

Studier har skapat en skadlig effekt på rotavirus vid +70 ° C efter 15 minuter; Vid exponering för ultraviolett strålning inaktiveras rotavirus också efter 15 minuter.

När det gäller deras motståndskraft mot effekten av allmänt använda desinfektionsmedel ligger rotavirus nära enterovirus och hepatit A. Därför är det i rotavirusinfektionerna och på sjukhus där det finns patienter lämpligt att genomföra desinfektionsåtgärder enligt regimer och använda de medel som rekommenderas för viral hepatit A- och enterovirusinfektioner (Bilaga N 4 till Hälsosekretariatet i Sovjetunionen N 752 av 07/08/81 och Säkerhetsdepartementets order i USSR N 916 av 08/04/83). Särskild uppmärksamhet bör ägnas åt korrekt hantering av händerna på personer som tjänar barnen, samt bröstvårtor, leksaker, diskar och andra föremål för patientvård.

Regelbunden ultraviolett bestrålning rekommenderas. Ultraviolett strålning utförs vanligtvis med hjälp av strålningsanordningar - OBN-150 på 30 kubikmeter. m rum, OBP-300 60 cu. m rum och andra. Oskärmade flöden inställda på 1 - 1,5 W per 1 cu. m rum i frånvaro av människor (för att undvika skador på slemhinnorna), skärmad - med en hastighet av 2 - 2,5 W per 1 cu. m, bestrålning kan utföras i närvaro av människor. Desinfektionstid - 30 - 40 minuter. Luftbestrålning bör utföras efter rengöring av rummet, byte av sängkläder och annat arbete relaterat till bildandet av damm-aerosol.

I specialiserade avdelningar på sjukhuset bör personalen ha andningsskydd.

Organisationen av sanitära och hygieniska åtgärder som syftar till att förebygga rotavirusinfektion utförs i enlighet med nuvarande instruktioner och rekommendationer för andra infektioner med den fekala orala mekanismen för patogenens spridning.

En av de effektiva åtgärderna för att förebygga rotavirusinfektion hos nyfödda är deras amning.

Särskilt förebyggande av rotavirusinfektion utförs inte.